Грамположительные бактерии имеют однослойную клеточную стенку, которая при окраске по Граму приобретает темно-синий или темно-фиолетовый цвет. У ряда видов таких микроорганизмов положительно окрашиваются по Граму только молодые активно размножающиеся клетки. Поэтому во избежание ошибок тинкториальные свойства изолятов оценивают в их молодых 12–18-часовых культурах.