|
Метод окраски мазков крови по Романовскому, состоящий в использовании
смеси эозина и метиленового синего, широко распространен во всем
мире. Наиболее известными вариантами этого метода являются методы
окраски мазков по Райту, Гимзе, Май–Грюнвальду и специальный двухкомпонентный
набор для быстрого окрашивания мазков Deltalab.
|
|
Окраска эозином – метиленовым синим по Май–Грюнвальду - налить на мазок 0,5 мл красителя Май–Грюнвальд и оставить высыхать на 3–4 минуты; - добавить равное количество воды рН 7,2 и осторожно перемешать; - оставить для окраски на 5–10 минут; - промыть мазок водой и высушить в вертикальном положении. Окраска азур-эозином – метиленовым синим по Гимзе - фиксировать мазок метанолом и просушить при комнатной температуре; - залить мазок раствором 10 капель красителя Гимзе в 10 мл воды рН 7,2; - оставить на 25 минут; - промыть мазок водой и высушить в вертикальном положении. Окраска эозином – метиленовым синим по Райту - налить на мазок 1 мл красителя Райта, через 1 минуту добавить 1 мл воды рН 7,2; - оставить мазок для окрашивания на 2–4 минуты, после чего промыть водой рН 7,2; - высушить мазок в вертикальном положении. Набор для быстрого окрашивания мазков крови Набор состоит из двух компонентов – красителя «А» и красителя «В», состав которых специально разработан для максимально быстрого и успешного окрашивания мазков крови и выявления широкого спектра патологий. Метод: - погрузить мазок в кювету с красителем А, подождать 5 секунд и просушить, т. е. дать краске стечь, прижав боковой край стекла к фильтровальной бумаге; - погрузить в стакан с чистой водой и просушить; - погрузить мазок в кювету с красителем В, подождать 10 секунд и просушить; - погрузить в чистую воду, вынуть мазок и высушить в вертикальном положении. Метод имеет существенное преимущество – специалист может по своему усмотрению варьировать интенсивность окраски мазка, увеличивая или уменьшая длительность экспозиции стекла в одном или в обоих красителях. Красители можно использовать многократно, но в этом случае необходимо фильтровать их каждые 4 дня. Результат окрашивания: НЕЙТРОФИЛЫ: цитоплазма розовая, мелкие гранулы – сиреневые. ЭОЗИНОФИЛЫ: цитоплазма розовая, крупные красные гранулы.МОНОЦИТЫ: цитоплазма окрашена в серый цвет. ЛЕЙКОЦИТЫ (крупные): цитоплазма светло-голубая. ЛЕЙКОЦИТЫ (мелкие): цитоплазма темно-голубая. БАЗОФИЛЫ: клетки наполнены темно-фиолетовыми гранулами. ЭРИТРОЦИТЫ: клетки бледно-красного цвета. ТРОМБОЦИТЫ: окрашены в сиренево-розовый цвет. Набор для окрашивания ретикулоцитов (Кат. № 540050) Ретикулоциты представляют собой эритроциты, содержащие остатки ARN (рибосом), которые реагируют с такими красителями, как брайт-крезиловый синий или новый метиленовый синий; в результате этой реакции остаточные рибосомы проявляются как волокна, отчетливо различимые при микроскопическом исследовании мазка. Подсчет ретикулоцитов является прекрасным методом контроля эритропоэза, поскольку ретикулоциты являются той стадией развития клеток красного ряда, на которой они покидают костный мозг. Данная стадия созревания эритроцита длится около 24 часов, по прошествии этого времени клетка превращается в зрелый эритроцит. Когда состояние анемии сопровождается большим содержанием ретикулоцитов (ретикулоцитоз), процесс рассматривается как регенеративный, т. е. костный мозг находится в процессе компенсаторного воспроизводства эритроцитов; если анемия сопровождается нормальным или сниженным количеством ретикулоцитов, нет оснований говорить о процессе компенсации и восстановления. Подсчет ретикулоцитов может производиться в цельной крови, взятой в антикоагулянт (К-3-ЭДТА), в течение 24 часов после взятия (или более при условии хранения образцов в холодильнике при +4 °С). Метод: - каждая пробирка 11?55 мм (3 мл) содержит 100 мкл стабилизированного буферного раствора брайт-крезилового синего; не- посредственно в пробирку поместить 2–3 капли крови, перемешать мягким встряхиванием и инкубировать при комнатной температуре 15 минут; - из содержимого пробирки приготовить мазок, микроскопировать. Срок годности набора составляет 24 месяца; хранить при температуре от +15 до +25 °С; не рекомендуется подолгу держать на солнце; оптимальный диапазон температур от 0 до +45 °С, не переворачивать при транспортировке во избежание скопления красителя под крышкой пробирки.
|